内參抗體(tǐ)可用于評價蛋白(bái)質免疫印迹法(Western Blot)的效率，比較凝膠中(zhōng)每孔的蛋白(bái)上樣量。此類對照可幫助确定樣品間表達水平的差異，以判斷是由細胞裂解物(wù)的實際蛋白(bái)水平導緻，還是由上樣量的差異導緻。

内參抗體(tǐ)主要功能

（1）檢測整個WB流程是否正常

（2）檢測基因表達産物(wù)是否正确

（3）比較産物(wù)微量的相對變化

（4）評價各個上樣孔内蛋白(bái)的總量是否基本一(yī)緻

圖一(yī)示例

内參抗體(tǐ)在目标蛋白(bái)的免疫熒光研究中(zhōng)，也可以作爲共染的陽性對照。内參抗體(tǐ)分(fēn)爲未标記型和标記型，标記物(wù)包括生(shēng)物(wù)素、HRP、FITC、PE、Cy染料和Alexa Fluor染料。

内參抗體(tǐ)種類很多，比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Vinculin、LaminB、PCNA等，對不同樣本選擇不一(yī)樣的内參抗體(tǐ)也是WB實驗成功的關鍵。本文将簡單介紹選擇内參抗體(tǐ)應遵循的五項原則：

一(yī)、樣本種屬來源：

首先要考慮實驗樣本來源于什麽物(wù)種。

1. 哺乳動物(wù)的組織或者細胞樣本，通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na,Katpase等。

2. 植物(wù)來源實驗樣本，則可以選擇plantactin、Rubisco等。

3. 其他來源樣本研究較少，所以就應該參照期刊文獻數據，選擇合适的蛋白(bái)作爲内參。

二、分(fēn)子量大(dà)小(xiǎo)：

選擇内參抗體(tǐ)時，應該考慮目的蛋白(bái)分(fēn)子量的大(dà)小(xiǎo)，一(yī)般保證目的蛋白(bái)與内參蛋白(bái)分(fēn)子量相差5KD以上。例如，目的蛋白(bái)分(fēn)子量爲40KD，此時不适宜選擇β-actin、與GAPDH作爲内參，可以考慮選擇α-Tubulin或者β-tubulin作爲内參。

三、表達水平：

選擇的内參蛋白(bái)需要在待測樣本中(zhōng)是高表達的。常用的内參蛋白(bái)是由管家基因高表達的，是細胞發育和維持細胞活力所必須的。例如，細胞核的内參蛋白(bái) PCNA，在 DNA S 期表達，因此對于非增殖細胞不推薦使用。

四、目的蛋白(bái)表達定位：

五、ELK Biotechnology可選相關内參：