以下(xià)所述中(zhōng)使用的曲線繪制軟件爲Curve E xpert1.4, 各位老師們如有需要即可點擊此鏈接下(xià)載自行下(xià)載使用；

可以采用各種繪圖軟件來繪制 ELISA 标準曲線，下(xià)面以“Curve Expert1.4”軟件爲例，繪制 ELISA 标準曲線的方法如下(xià)；

1．啓動“Curve Expert”

2．X 軸輸入标準品的 OD 值（雙抗夾心輸入 OD-空白(bái)值），Y 軸輸入所對應的濃度值，如圖：

3．單擊[運行]按鈕，出現如下(xià)對話(huà)框

4．單擊[ok]按鈕，出現如下(xià)兩個對話(huà)框，關閉下(xià)面一(yī)個對話(huà)框

5. 在對話(huà)框的右上角出現一(yī)些曲線的名稱，從“1”開(kāi)始依次點擊曲線名稱，在右下(xià)角會出現相應拟合的曲線。（一(yī)般選擇第一(yī)個多項式拟合）

6. 根據拟合的曲線選取 ELISA 拟合度最佳的曲線雙擊，出現如下(xià)對話(huà)框：注意：選擇系數（即“r”值）最好的曲線方程來進行運算。

在下(xià)面的對話(huà)框 右上角有“r”值，當“r”值越接近 1 拟合度越好

7．按[Ctrl]鍵+[L]鍵，出現如下(xià)對話(huà)框：

8．輸入标準的 OD 值，單擊[Calculate]按忸，即可得到待測蛋白(bái)的實際含量（标本稀釋了 N 倍，運算出的數值應在乘以 N）。 

9. 如想得到 ELISA 拟合曲線的方程，可在步驟 6 的對話(huà)框空白(bái)處右擊，選擇”Information”

10. 得到如下(xià)對話(huà)框：點擊“Copy”

在你需要的位置粘貼即可得到如下(xià)數據：

Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2) 

Coefficient Data: 

a = -21.531017 

b = 212.05019 

c = -0.24054479 d = 0.018060778 

11. 修改作圖中(zhōng) X,Y 坐标軸高度以及相關屬性 選擇步驟 9 所示圖中(zhōng)的第二排“Graph Properties”，修改好後點擊 OK 保存

1、樣品的濃度是根據标準曲線計算出來的，所以要嚴格按照說明書(shū)指示進行操作，标準曲線能直接反映操作是否準确。