技術專欄
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ELISA實驗中(zhōng)标曲怎麽做？
曲線繪制的使用工(gōng)具 以下(xià)所述中(zhōng)使用的曲線繪制軟件爲Curve E xpert1.4, 各位老師們如有需要即可點擊此鏈接下(xià)載自行下(xià)載使用； 标準曲線的繪制 可以采用各種繪圖軟件來繪制 ELISA 标準曲線，下(xià)面以“Curve Expert1.4”軟件爲例，繪制 ELISA 标準曲線的方法如下(xià)； 1．啓動“Curve Expert” 2．X 軸輸入标準品的 OD 值（雙抗夾心輸入 OD-空白(bái)值），Y 軸輸入所對應的濃度值
2024-01-19
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實驗動物(wù)如何采血及采血管的選擇
實驗動物(wù)采血 在實驗研究中(zhōng)，經常會采集實驗動物(wù)血液用于分(fēn)析和評估動物(wù)體(tǐ)内的生(shēng)理和病理情況。根據不同的實驗設計和要求及動物(wù)的特性和生(shēng)理差異，選擇合适的采血方法，可以減少動物(wù)傷害，提高實驗的成功率和結果的可靠性。今天小(xiǎo)編給大(dà)家普及下(xià)實驗動物(wù)采血方法及采血管的選擇。 01 大(dà)鼠、小(xiǎo)鼠采血方法 尾尖采血（剪尾采血） 采血方法：動物(wù)麻醉後并固定，将鼠尾在45-50℃溫水中(zhōng)浸泡數分(fēn)鍾，也可用二甲苯等化學藥物(wù)塗擦，使局新血管擴張。擦幹尾部，用酒
2023-07-27
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WB實驗之内參選擇
免疫印迹（Western Blot）在研究蛋白(bái)相關實驗中(zhōng)是關鍵技術，由于實驗周期較長、步驟繁瑣，影響因素較多，在實驗過程中(zhōng)經常會遇到各種難題。我(wǒ)們需要追根求源，查找并修複問題。今天我(wǒ)們講解下(xià)WB實驗中(zhōng)内參的選擇。 什麽是内參及内參的作用 内參即是内部參照（Internal control），是指在組織和細胞中(zhōng)表達相對穩定的一(yī)類蛋白(bái)質，通常由管家基因編碼。這些蛋白(bái)質被用作檢測蛋白(bái)表達水平變化時的參照物(wù)，以确定實驗的準确性和可重複性。 在Western Blot實驗中(zhōng)，我(wǒ)們使用内參其實就是使用與内參對應的抗體(tǐ)來檢測内參的
2023-06-14
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ELK Biotechnology總結Elisa實驗中(zhōng)細胞樣本的制備與保存
細胞培養上清 ①将細胞培養上清液吸入離(lí)心管中(zhōng)，在2-8℃下(xià)以1000×g離(lí)心20分(fēn)鍾，除去(qù)細胞碎片和雜(zá)質，收集上清液備用， ②樣本保存在-20℃或-80℃，避免反複凍融。 01 uniprot Q:那什麽情況下(xià)需要測細胞裂解液，什麽情況下(xià)是檢測細胞培養液上清呢？ A:首先從細胞培養的形态（貼壁細胞、懸浮細胞）所檢測蛋白(bái)分(fēn)泌表達位置： 在uniprot蛋白(bái)數據庫中(zhōng)Subcellular Location 欄
2022-12-13
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支原體(tǐ)簡易檢測法
Trizol 法抽提待檢測細胞的RNA（推薦使用 TRIpure總RNA提取試劑 貨号：EP013），反轉錄爲CDNA 後裔支原體(tǐ) 檢測引物(wù)PCR 檢測細胞支原體(tǐ)污染情況。 支原體(tǐ)檢測引物(wù) Mycoplasma_F01 GGG AGC AAA CAG GAT TAG TAT CCC T Mycoplasma_R01 TGC ACC ATC TGT CAC TCT GTT AAC CTC 40 cycles，63
2022-06-23
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玩轉uniprot數據庫
一(yī)、Uniprot蛋白(bái)數據庫介紹及使用詳解 Uniprot數據庫是資(zī)源最廣、信息最豐富的蛋白(bái)質數據庫，是查詢蛋白(bái)功能的首選數據庫。Uniprot數據庫由Swiss-Prot、TrEMBL和PIR-PSD三大(dà)子數據庫構成，數據主要來自于各物(wù)種基因組測序完成後得到的全基因蛋白(bái)質序列，并包含了很多來自文獻中(zhōng)的蛋白(bái)及其功能信息。尤其是swiss-prot 子數據庫，庫中(zhōng)蛋白(bái)質信息都是手工(gōng)核對過的 ，非冗餘， 有詳細注釋信息的蛋白(bái)數據。作爲一(yī)名科研工(gōng)作者，Uniprot數據庫的使用技能應該是必備的技能之一(yī)。 （1）UniProtKB（UniProt Knowledgebase）是蛋白(bái)質序列、
2022-06-07
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RNA樣本準備指南(nán)
1、樣本RNA得率以及各類項目最低起始量 各樣本Total RNA得率統計（僅供參考）： 測序項目推薦起始量（起始量僅供參考，外(wài)泌體(tǐ)不允許18s/28s rRNA有峰）： 表達譜芯片及小(xiǎo)RNA測序體(tǐ)液樣本及外(wài)泌體(tǐ)項目起始量（僅供參考） 2、各類樣本準備指南(nán) 2.1 動物(wù)組織/臨床組織采集 ① 取新鮮組織，組織體(tǐ)積要小(xiǎo)，盡量長寬高≤0.5cm，考慮到可操作性，所切組織塊的大(dà)小(xiǎo)可參考綠豆顆粒的大(dà)小(xiǎo) ② 去(qù)除非研究的組織類型（如結締組織，脂肪組織等），如果是臨床病變組織的取材要正确判斷病變以及正常組織，應将病變組織
2022-06-06
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淺析免疫共沉澱(Co-IP)原理和詳細實驗步驟教程
一(yī)、原理：免疫共沉澱（Co-Immunoprecipitation）是以抗體(tǐ)和抗原之間的專一(yī)性作用爲基礎的用于研究蛋白(bái)質相互作用的經典方法。是确定兩種蛋白(bái)質在完整細胞内生(shēng)理性相互作用的有效方法。 其原理是：當細胞在非變性條件下(xià)被裂解時，完整細胞内存在的許多蛋白(bái)質－蛋白(bái)質間的相互作用被保留了下(xià)來。如果用蛋白(bái)質X的抗體(tǐ)免疫沉澱X，那麽與X在體(tǐ)内結合的蛋白(bái)質Y也能沉澱下(xià)來。 目前多用精制的prorein A預先結合固化在argarose的beads上，使之與含有抗原的溶液及抗體(tǐ)反應後，beads上的prorein A就能吸附抗原達到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目标蛋白(bái)質是否在體(tǐ)内結
2022-06-06
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