技術專欄
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微生(shēng)物(wù)代謝産物(wù)氧化三甲胺（TMAO）可以激活抗腫瘤免疫，提高三陰性乳腺癌免疫治療療效
乳腺癌的發病率逐年增高，并成爲中(zhōng)國女性發病率最高的惡性腫瘤，是人們常說的“紅顔殺手”。其中(zhōng)，三陰性乳腺癌惡性程度較高，患者生(shēng)存預後較差，易出現早期複發和轉移，且既往缺乏有效的針對性治療策略，素有最“毒”乳腺癌之稱。近日，複旦大(dà)學腫瘤醫院邵志(zhì)敏教授、江一(yī)舟教授課題組攜手複旦大(dà)學基礎醫學院教育部/衛健委/醫科院醫學分(fēn)子病毒學重點實驗室趙超課題組，發現微生(shēng)物(wù)代謝産物(wù)氧化三甲胺（TMAO）可以激活抗腫瘤免疫，提高三陰性乳腺癌免疫治療療效。這意味着微生(shēng)物(wù)代謝産物(wù)TMAO有望成爲三陰性乳腺癌臨床免疫治療的新策略，助推免疫治療。該項重要研究成果已在北(běi)京時間3月12日淩晨在國際權威期刊Cell Metabol
2022-12-15
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ELK Biotechnology總結實驗大(dà)鼠、小(xiǎo)鼠常用的采血方法
常見小(xiǎo)鼠采血方法 小(xiǎo)鼠是科研實驗中(zhōng)常用的實驗動物(wù)，但由于其體(tǐ)積小(xiǎo)，血管細，采血難度大(dà)，進而影響采血的質量。 ELK簡要總結了常見的小(xiǎo)鼠采血方法，僅供參考： 一(yī)隻成年小(xiǎo)鼠的循環血量大(dà)約是1.5~2.5ml，大(dà)約體(tǐ)重的 6~8%。在對營養狀況良好的小(xiǎo)鼠進行采血時，單次采血量最多可以到達循環血量的10%，（例：若20克小(xiǎo)鼠，它的總血量約占1.2-1.4毫升，即每次取120ul-140ul血液不會對小(xiǎo)鼠有太大(dà)的影響）。采血之後應該給予溫熱的等滲溶液補充，可以在2~3個星期内恢複原有的水平。兩周采血量小(xiǎo)于血液循環的10%，單周小(xiǎo)于7.5%，小(xiǎo)鼠血液循環7
2022-09-20
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ELK組織勻漿樣本的收集處理與保存（史上最全）
組織勻漿定義：将分(fēn)化的細胞群用物(wù)理機械手段或其它方法，使細胞破碎，細胞内容物(wù)釋放(fàng)，與細胞碎片形成的固液混合形式的濃稠液體(tǐ)。 一(yī)、取适量組織塊，用預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.4）沖洗，去(qù)除表面殘留的血液與雜(zá)質。（很多用戶疑惑，這個适量，到底是多少？ELISA試劑盒檢測中(zhōng)：血清或細胞上清樣本用量100μL/指标（單孔）；組織用量15mg/指标（單孔），差不多幹枯綠豆大(dà)小(xiǎo)。 ）具體(tǐ)老鼠各器官大(dà)小(xiǎo)可見下(xià)圖。 二、将組織塊稱重，再剪切成盡可能的小(xiǎo)碎塊，以便充分(fēn)勻漿； 三、可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：
2022-09-20
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ELISA實驗中(zhōng)做好标曲爲什麽這麽重要
酶聯免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作，可以簡單地回答樣本中(zhōng)有多少蛋白(bái)質/多肽/抗體(tǐ)這一(yī)基本問題，是科研中(zhōng)比較常用的一(yī)種檢測方法。而這種簡單的分(fēn)析方法的核心，就是标準曲線。沒有它，我(wǒ)們的實驗就變成了一(yī)個二元的“是/不是”測試。有了它，我(wǒ)們可以深入研究生(shēng)物(wù)反應的細節。那麽，是什麽使得标準曲線如此強大(dà)呢?讓我(wǒ)們在ELISA的背景來讨論這個問題。 簡單地說，标準品就是一(yī)系列已知(zhī)目标蛋白(bái)數量的陽性對照。例如，如果對人類IgG進行ELISA檢測，标準曲線将包含逐漸減少的已知(zhī)量的人類IgG，它會讓你立刻得出一(yī)系列的結論。 1.我(wǒ)的EL
2022-08-01
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NF-κB經典信号通路
NF-kB(核因子激活的B細胞的k-輕槌增強)在細胞因子誘導的基因表達中(zhōng)起關鍵性的調控作用，它調控的基因編碼：急性期反應蛋白(bái)、細胞因子、細胞粘附分(fēn)子、免疫調節分(fēn)子、病毒癌基因、生(shēng)長因子、轉錄和生(shēng)長調控因子等。通過調控多種基因的表達，NF-kB參與免疫反應、炎症反應、細胞凋亡、腫瘤發生(shēng)等多種生(shēng)物(wù)進程。 NF-kB家族有由cRel, RelA (p65) , RelB, NF-kB1 (p50)、NF-kB2 (p52)組成,它們在N端都具有Rel同源結構域，其中(zhōng)cReI, ReIA (p65)和ReIB存在轉錄激活區(TAD)，可正向調節基因表達；p52和p50分(fēn)别由前體(tǐ)蛋白(bái)p100、
2022-07-21
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PCR、qPCR、RT-PCR、Real-time PCR區别淺析
PCR技術介紹： 聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction,PCR）是在體(tǐ)外(wài)酶促擴增特定DNA片段的技術，由美國Kary Mullis及其同事于1985年發明。熱穩定性Taq DNA聚合酶的應用和自動化裝置的發明與完善，使PCR技術進入實用階段。該技術的發明和廣泛應用，大(dà)大(dà)推動了分(fēn)子生(shēng)物(wù)學各相關學科的發展，發明者也因此獲得了1993年的諾貝爾化學獎。 随着PCR技術的成熟，派生(shēng)了不少相關技術。這類技術具有敏感、特異、快速和簡單等優勢，在微生(shēng)物(wù)檢驗中(zhōng)的應用越來越廣，不少國家将其納入檢驗的标準方法；
2022-07-13
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PD-1人源化小(xiǎo)鼠模型介紹
品系背景∶C57BL/6N 品系構建策略∶ 在小(xiǎo)鼠PD-1基因位點敲入人源PD-1胞外(wài)域序列，保留小(xiǎo)鼠跨膜域和胞内域，構建嵌合型PD-1人源化小(xiǎo)鼠模型。 品系說明∶ hPD-1在小(xiǎo)鼠體(tǐ)内具有正常的生(shēng)理表達和調節模式。 PD-1胞外(wài)域人源化，利于hPD-1靶向藥物(wù)的識别。 保留小(xiǎo)鼠PD-1胞内域，保證正常的胞内信号轉導。 小(xiǎo)鼠靶基因不表達，避免交叉反應。 小(xiǎo)鼠的免疫系統功能健全。 研究應用∶ 本模型可用于評估hPD-1靶向藥物(wù)在免疫健全小(xiǎo)鼠體(tǐ)内的有效性及安全性∶ 與人源化腫瘤細胞系聯用 例如∶與MC38-hPD-L1腫瘤細胞
2022-05-23
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簡述鐵死亡與慢(màn)性病鐵代謝調控機制
鐵是人體(tǐ)必需的微量元素，不僅參與血紅素合成，而且作爲一(yī)些關鍵酶的輔基在多種生(shēng)理代謝中(zhōng)發揮重要功能。鐵缺乏可引發缺鐵性貧血。人類遺傳性血色病是一(yī)類由基因突變引 起的鐵過載疾病，導緻多個器官中(zhōng)鐵積累，皮膚色素沉積及多種器官的病變，如2型糖尿病、 肝纖維化等。超過85% 血色病患者攜帶遺傳性血色素沉着病蛋白(bái)（hemochromatosis protein，HFE）突變基因, 少數患者攜帶鐵調素(hepcidin，HAMP)、 鐵調素調節蛋白(bái)(hemojuvelin,HJV)、鐵外(wài)排蛋白(bái)(ferroportin 1,FPN)或轉鐵蛋白(bái)受體(tǐ)(transferrinreceptor,TFR)2突變基因，近
2022-05-23
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